淺談方便面中有害物質(zhì)的檢測與分析論文
國民經(jīng)濟(jì)發(fā)展迅速，人民生活水平不斷提高，人們對食品的安全問題也越來越重視。本文基于對方便面中磷酸鹽、亞硝酸鹽和鄰苯二甲酸二丁酯的檢測探究方便面可能存在的食品安全問題。磷酸鹽在其加工制品生產(chǎn)加工過程中起著重要的膨松、抗氧化等作用，當(dāng)人體攝入過量的磷酸鹽時，就有可能危害身體健康，長時間還會導(dǎo)致人體鈣磷比例失衡。亞硝酸鹽是一種毒性很強(qiáng)的致癌物，它能與胺類物質(zhì)生成亞硝胺而致癌，攝入會對人體造成危害, 更為嚴(yán)重的是引起高鐵血紅蛋白癥, 導(dǎo)致組織缺氧, 還可使血管擴(kuò)張、血壓降低。鄰苯二甲酸酯是一類能起到軟化作用的化學(xué)品，它被普遍應(yīng)用于玩具、食品包裝材料、醫(yī)用血袋和膠管等數(shù)百種產(chǎn)品中。它是世界衛(wèi)生組織1995 年公布的必須控制的一類擾亂內(nèi)分泌的化學(xué)物質(zhì)，不易被人體代謝，易于在人體肝臟中沉積，它們具有脂溶性、難分解性和高累積性，能損害人類的生殖系統(tǒng)，影響生物體內(nèi)激素的正常分泌，導(dǎo)致細(xì)胞突變，致畸和致癌，日積月累將嚴(yán)重危害人類的健康。
1 面餅中磷酸鹽的檢測
國家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定食品中添加的磷酸鹽 ( 以磷酸根計) 不得超過 5.0g /kg[5]，小麥粉(面餅的主要成分)含有的磷主要以無機(jī)態(tài)存，按國標(biāo)5009. 87 - 2003 《食品中磷的測定》第三法測定小麥粉制品的磷酸鹽含量的方法，我們對泡面面餅內(nèi)的磷酸鹽的含量進(jìn)行測定。
1.1 實驗原理
試樣中的磷酸鹽與酸性鉬酸銨作用, 生成淡黃色的磷鉬酸鹽, 此鹽可經(jīng)還原呈顯藍(lán)色, 一般稱為鉬藍(lán)。藍(lán)色的深淺與磷酸鹽含量成正比。用分光光度法在波長650nm 處測定試樣中磷酸鹽含量。
1.2 材料、儀器與化學(xué)試劑
1.2.1 材料
A 康師傅鮮蝦魚板面;B 康師傅鹵香牛肉面;C 白象老壇酸豆角牛肉面;鉬酸銨;磷酸二氫鈉(帶有2 分子的結(jié)晶水);對苯二酚;亞硫酸鈉;濃硫酸(AR);鹽酸(AR);去離子水。
1.2.2 儀器
電子天平;風(fēng)干箱;分光光度計;加熱板;馬弗爐。
1.2.3 化學(xué)試劑
硫酸(75%)： 取75ml 濃硫酸用去離子水稀釋到100ml。鹽酸(1+1)：取50ml 室溫濃鹽酸用去離子水稀釋到100ml。鉬酸銨溶液(50g/l)： 取25g 鉬酸銨溶解在300ml 水中，再用75% 的H 2SO4 溶液定容到500ml。磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲備液(10ug/ml)：精確量取0.41g 的NaH2PO4·2H2O 用去離子水定容到500ml，在從這500ml的溶液中精確量取10ml 并用去離子水定容到500ml。
對苯二酚(5g/l)：現(xiàn)配現(xiàn)用，量取0.5g 的對苯二酚，用去離子水定容到100ml，再滴加一滴75% 的硫酸。亞硫酸鈉溶液(200g/l)：現(xiàn)配現(xiàn)用，量取20g 的亞硫酸鈉溶解成100ml 的溶液(在溶解中可能要加熱使其溶解)。樣液的制備: 分別取不同三個品牌的泡面面餅A、B、C 各20g 左右，用研缽研成粉狀。然后在70℃ -80℃風(fēng)干箱內(nèi)風(fēng)干5 個小時。在分別稱取2g 于干鍋中在550℃的馬弗爐中灰化(升溫1 小時，恒溫5 小時，降溫一小時)，完全灰化后是白色的粉狀物質(zhì)，若仍有黑色物質(zhì)存在就重新灰化。得到三份產(chǎn)物分別加入(1+1)的鹽酸2ml，并用去離子水定容到100ml。
1.3 實驗過程
1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
分別吸取磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲備液0.0ml(零管溶液);7.0ml;8.0ml;9.0ml;10.0ml;11.0 ml 于25ml 的容量瓶中，再依次加入2ml 的鉬酸銨溶液,1ml 的亞硫酸鈉溶液,1ml 的對苯二酚，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。靜止40min 后，以零管溶液為空白，在分光光度計于650nm 處比色，測定各標(biāo)準(zhǔn)工作液的吸光度值，并繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。
1.3.2 樣液的吸光度的測定
分別取去離子水、A 樣液、B 樣液、C 樣液 各2ml 于25ml 的容量瓶中，再依次加入2ml 的鉬酸銨溶液(50g/L);1ml 的亞硫酸鈉溶液(200g/L);1ml的對苯二酚(5g/L)，加蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。靜止40min 后，以零管溶液為空白，在分光光度計于 650nm處比色，測定各樣液的吸光度值。
1.3.3 計算過程
10b 25l gc mlmlμ×=式中C b 是磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)工作液的質(zhì)量濃度，單位：μg/ml。X= 25 100 1000 10 62 2x ml c ml gml g ×× × ×C x 是樣品中磷酸鹽的質(zhì)量濃度(由標(biāo)準(zhǔn)工作曲線回歸方程為y =0.0301x +65所得)，X 是每1kg 的面餅中所含的磷酸鹽的質(zhì)量，單位：g/kg。
1.4 結(jié)果
通過分光光度計檢測可得到標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度如下回歸方程為 y = 0.0301x + 65 , 相關(guān)系數(shù)r = 0.9942; 在低濃度范圍內(nèi)(0-5ug/ml), 線性曲線良好。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程以及樣液的吸光度可計算樣液中磷酸鹽含量如下表：(注：A 為康師傅鮮蝦魚板面;B 為康師傅鹵香牛肉面;C 為白象老壇酸豆角牛肉面)
1.5 結(jié)論
由以上圖表分析可知方便面面餅中磷酸鹽的含量在2.5g/kg-5.0g/kg 之間，接近于國家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)使用量5.0g/kg。雖然沒有超標(biāo)，但經(jīng)實驗驗證磷酸鹽含量還是比較高的，不可多吃或長期食用。
2 料包中亞硝酸鹽的檢測
亞硝酸鹽是食品添加劑的一種，起著色、防腐作用，被廣泛用于熟肉類、灌腸類和罐頭等動物性食品。按GB2760 規(guī)定一般食品中最大殘留量為0.03g/kg[5]。攝入0.2-0.5 g 即可引起食物中毒，3 g 可致死。
2.1 實驗原理
在弱酸性介質(zhì)中, 亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成的重氮化合物, 再與鹽酸萘乙二胺偶聯(lián)成紫紅色的偶氮染料的原理。用分光光度法在波長550nm 處測定試樣中亞硝酸鹽含量。
2.2 材料、儀器與化學(xué)試劑
2.2.1 材料
A 康師傅鮮蝦魚板面;B 康師傅鹵香牛肉面;C 白象老壇酸豆角牛肉面;亞硝酸鈉;對氨基苯磺酸;鹽酸萘乙二胺;活性炭。
2.2.2 儀器
分光光度計;電子天平;干燥箱;抽濾機(jī)。
2.2.3 化學(xué)試劑
亞硝酸鈉溶液(0.5mg/ml): 稱取0.2500 g 已于干燥器中放置 24 h 的亞硝酸鈉, 溶于500 ml 容量瓶中, 加水稀釋至刻度。亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)儲備液(5μg/ml): 吸取上述亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液1 ml 于 100ml 容量瓶中, 加水稀釋至刻度(現(xiàn)配先用)。
對氨基苯磺酸溶液(4g/l): 分別稱取0.4g 溶于100 ml20% 鹽酸溶液中,置棕色瓶中混勻, 避光保存。鹽酸萘乙二胺溶液(2g/l): 稱取0.2g 鹽酸萘乙二胺, 溶解于100ml 水中,混勻后, 置于棕色瓶中, 避光保存。樣液的處理：從三個不同品牌的泡面粉包中各取6 克樣品，分別為A. 康師傅鹵香牛肉面、B. 康師傅鮮蝦魚板面、C 白象老壇酸豆角牛肉面，將樣品各自溶于燒杯中，并稀釋至100mL，并進(jìn)行一次抽濾，得到的液體加入活性炭，抽濾一次。得到待測樣液。
2.3 實驗過程
2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
吸取0ml(零管溶液),0.2 ml,0.4ml,0.6 ml, 0.8 ml,1.0 ml,1.5 ml,2.0ml5μg/ml 標(biāo)準(zhǔn)儲備液, 于50 ml 容量瓶中, 分別加入 2 ml 對氨基苯磺酸(20% 鹽酸) 溶液, 搖勻, 放置3 min-5min, 再加入 1 ml 鹽酸萘乙二胺溶液,加水至刻度, 搖勻, 放置10 min, 以零管溶液為空白組，在 549 nm 處測其吸光度。繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。
2.3.2 樣液的吸光度的測定[8]
分別取去離子水、A 樣液、B 樣液、C 樣液 各4ml 于50ml 的容量瓶中，分別加入 2 ml 對氨基苯磺酸(20% 鹽酸)溶液, 搖勻, 放置3min ～ 5min, 再加入1ml 鹽酸萘乙二胺溶液, 加水至刻度,搖勻, 放置10min, 在549nm 處測其吸光度。
2.3.3 過程計算
5 /b 50c L g mlml× μ=式中C b 是亞硝酸鹽工作液的.質(zhì)量濃度，單位：μg/ml;L 是亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)儲備液(5ug/ml)的加入量。單位:ml。50 100 1000 10 62 x 6X ml c ml gml g= × × × × C x 是待測樣液(測吸光度)的亞硝酸鹽質(zhì)量濃度(由標(biāo)準(zhǔn)工作曲線回歸方程y=0.7717x+0.0011 計算得)。單位：μg/mlX 是每1kg 的調(diào)味粉中所含的亞硝酸鹽的質(zhì)量。單位：g/kg
2.4 結(jié)果
通過分光光度計檢測可得到標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度如下：綜上數(shù)據(jù)得：回歸方程為y = 0.7717x + 0.001 , 相 關(guān)系 數(shù)R2= 0.998; 在低濃度范圍內(nèi)(0 ～ 0.2μg/ml), 線性曲線良好。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程以及樣液的吸光度可計算樣品中亞硝酸鹽的含量：(注：A 為康師傅鮮蝦魚板面;B為康師傅鹵香牛肉面;C 為白象老壇酸豆角牛肉面。
2.5 結(jié)論
由以上圖標(biāo)可得三種泡面中，亞硝酸鹽含量都是合格的，其中康師傅鮮蝦魚板面最低，白象老壇酸豆角牛肉面最高，雖然都未超過國標(biāo)GB2760規(guī)定殘留量0.03 g/kg，但是每天人體攝入的其他食物中也會有亞硝酸鹽，出于對健康的考慮，建議每天最多可吃一包方便面。
3 包裝桶中鄰苯二甲酸二丁酯的溶出檢測
方便面以其美味、便捷成為大學(xué)生經(jīng)常食用的食品，但其包裝的安全問題卻常被忽略。本實驗完全模擬方便面的浸泡環(huán)境，針對碗裝方便面包裝物中DBP(鄰苯二甲酸二丁酯)向浸泡液的遷移情況，采用高效液相色譜法，對DBP 的溶出量進(jìn)行研究。
3.1 實驗原理
將剪碎后的內(nèi)膜用溶有醬包、調(diào)味包的沸水浸泡，用高效液相色譜法進(jìn)行樣液檢測，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣液中DBP 的含量。2002 / 72 / EEC指令規(guī)定了包裝材料中化學(xué)物遷移的最高值[9], 塑料包裝物或容器在包裝和盛放、貯存食品的過程中，以容器形式盛裝食品的, 該容器遷移到食品中的物質(zhì)總量不能超過60mg/ kg。
3.2 材料和方法
3.2.1 儀器與設(shè)備
高效液相色譜儀;抽濾機(jī);電子天平等。
3.2.2 試劑與材料
DBP 標(biāo)準(zhǔn)品;甲醇(色譜純);去離子水;各種品牌方便面。
3.2.3 標(biāo)準(zhǔn)儲備液的制備
稱取標(biāo)準(zhǔn)品DBP0.0065g，溶于6.5ml甲醇中，得到濃度為1mg/ml 的標(biāo)準(zhǔn)儲備液量取標(biāo)準(zhǔn)儲備液1ml 于100ml 容量瓶中，甲醇定容，得到濃度為0.01mg/ml 的混合儲備液。將混合儲備液密封保存。
3.2.4 方便面桶的試樣處理
方便面的紙杯取出，取其中最內(nèi)層塑料薄膜，清洗掉紙層，晾干，備用。將塑料薄膜剪碎后置于500ml 燒杯中，加入醬包、調(diào)味包，然后倒入300ml 沸水，燒杯口用紙層蓋住，浸泡10min, 然后進(jìn)行抽濾。得到的樣液準(zhǔn)備液相處理。
3.2.5 液相色譜條件
色譜柱：Agilent HC-C18 柱(4.6mmi.d.×250mm，5μm);柱溫：常溫;流動相：水：甲醇=10：90;流速1ml/min;檢測波長228nm。
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線圖譜
標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖如圖3-1，濃度為0.01mg/ml，進(jìn)樣量為20ul。DBP 的保留時間在5.367 左右。
3.3.2 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線
分別取0.01mg/ml 的標(biāo)準(zhǔn)儲備液1ul、2ul、5ul、10ul、20ul， 按液相色譜法進(jìn)行測定，外標(biāo)法定量。以色譜峰的峰面積為縱坐標(biāo)，DBP 的質(zhì)量(ug)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線如圖3-2，回歸方程和相關(guān)系數(shù)見表3-1。結(jié)果表明，DBP(鄰苯二甲酸二丁酯)的質(zhì)量在0.01-0.2μg 范圍與峰面積呈較好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)大于0.997。
3.3.3 樣品檢測結(jié)果
對于不同品牌方便面桶處理溶液，均取10ul 進(jìn)行高效液相分析, 并按照標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出3 個樣品中DBP 的含量: (注：A 為康師傅鮮蝦魚板面;B為康師傅鹵香牛肉面;C 為白象老壇酸豆角牛肉面。)
3.4 結(jié)論
試驗結(jié)果表明，采用模擬液浸泡方法，結(jié)合高效液相色譜分析手段對方便面包裝物中DBP(鄰苯二甲酸二丁酯)的含量進(jìn)行測定，方便面包裝物浸泡液中檢出鄰苯二甲酸二丁酯，表明包裝物中鄰苯二甲酸二丁酯在浸泡食用條件下具有溶出的可能。
4 結(jié)語
從本實驗探究結(jié)果來看，三種化學(xué)成分的含量雖然在國標(biāo)內(nèi)，但是食用多包方便面這些有害物質(zhì)的攝入量就有可能超標(biāo)，日積月累會對人體造成不可估量的傷害。而且，方便面作為一種快餐，無法滿足人體進(jìn)行正常生命活動的營養(yǎng)需求。因此向廣大學(xué)生及上班族倡導(dǎo)：少吃泡面，健康飲食。
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