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PRRSV云南株的分離與鑒定
從云南某豬場(chǎng)采取病料經(jīng)RT-PCR檢測(cè)為豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRS)陽(yáng)性,將其處理后接種到豬肺泡巨噬細(xì)胞(PAM)和Marc-145細(xì)胞上.接種后3 d,豬肺巨噬細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)細(xì)胞病變(CPE);Marc-145細(xì)胞盲傳3代后,細(xì)胞也出現(xiàn)了CPE.對(duì)出現(xiàn)CPE的細(xì)胞培養(yǎng)物,用RT-PCR法、間接免疫熒光試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果均為PRRSV陽(yáng)性;細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)PEG初步濃縮后,接種到PRRSV陰性,PRV、CSFV抗體陽(yáng)性的仔豬,15 d后豬只出現(xiàn)體溫升高并伴有食欲減退,精神不振等癥狀.采血并用同上的RT-PCR法檢測(cè),結(jié)果為陽(yáng)性;采血用同上的RT-PCR法檢測(cè),結(jié)果亦為陽(yáng)性;用電鏡對(duì)純化后的病毒進(jìn)行觀察,可見(jiàn)有囊膜包裹的圓形病毒粒子,其直徑約為50 nm;間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)可見(jiàn)黃色熒光;TCID50測(cè)定其毒價(jià)為10-4.75/0.1 mL.該病毒對(duì)氯仿、紫外線(xiàn)、酸堿度變化(pH<5.0或pH>7.5)和熱敏感;結(jié)果表明,已成功分離獲得一株P(guān)RRSV云南地方流行毒株,命名為YN-1.
作 者: 段博芳 沈艷萍 楊貴樹(shù) 張?飛 吳靜敏 段綱 尹革芬 作者單位: 段博芳,楊貴樹(shù),張?飛,吳靜敏,段綱,尹革芬(云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,云南昆明,650201)沈艷萍(振太畜牧獸醫(yī)站,云南鎮(zhèn)沅,666508)
刊 名: 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展 PKU 英文刊名: PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE 年,卷(期): 2010 31(4) 分類(lèi)號(hào): S852.659.6 S858.28 關(guān)鍵詞: 豬繁殖與呼吸綜合征病毒 分離 鑒定【PRRSV云南株的分離與鑒定】相關(guān)文章:
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