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載體介導(dǎo)的人支氣管上皮細(xì)胞DNA聚合酶β基因的靶向RNA干擾
目的運用載體介導(dǎo)的RNA干擾技術(shù)靶向抑制人DNA聚合酶β基因在支氣管上皮細(xì)胞中的表達(dá),為研究DNA聚合酶β在環(huán)境化學(xué)污染物所致DNA損傷修復(fù)中的功能和機(jī)制作準(zhǔn)備.方法利用分子克隆技術(shù)構(gòu)建含pU6啟動子的人DNA聚合酶β基因RNA干擾特異性綠色熒光蛋白C1載體重組子"pEGFP-C1-U6-dsRNA";以脂質(zhì)體法將載體重組子轉(zhuǎn)染人支氣管上皮細(xì)胞,同時以空白細(xì)胞和空載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞作對照;在經(jīng)G418篩選后,以熒光顯微成像技術(shù)觀察細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效果,以蛋白印跡法分析轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中的DNA聚合酶β表達(dá)情況.結(jié)果在轉(zhuǎn)染重組子的細(xì)胞中,DNA聚合酶β的表達(dá)明顯下調(diào),僅相當(dāng)于正常細(xì)胞的17.3%.結(jié)論人支氣管上皮細(xì)胞DNA聚合酶β基因的靶向抑制成功.
作 者： 胡大林 莊志雄 劉移民 何云 紀(jì)衛(wèi)東 方道奎 沙焱 涂曉志 楊建平 作者單位： 中山大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院,廣州,510080 刊 名： 衛(wèi)生研究 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF HYGIENE RESEARCH 年，卷(期)： 2006 35(2) 分類號： Q555 R994.6 關(guān)鍵詞： 重組載體 RNA干擾 DNA聚合酶β基因【載體介導(dǎo)的人支氣管上皮細(xì)胞DNA聚合酶β基因的靶向RNA干擾】相關(guān)文章：
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