人源性中性內(nèi)肽酶穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的建立

目的:獲得中性內(nèi)肽酶(NEP)及失活中性內(nèi)肽酶(inNEP)穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株.方法:用酶切及基因測序鑒定質(zhì)粒pcDNA3.1-hNEP及pcDNA3.1-inNEP(E585V);以脂質(zhì)體LipofectamineTM2000介導(dǎo)pcDNA3.1-hNEP及pcDNA3.1-inNEP(E585V)轉(zhuǎn)染神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SK-N-SH,分別獲得兩者的穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株;用RT-PCR及Western blot分析NEP的表達(dá).結(jié)果:轉(zhuǎn)染4周后,可見G418單克隆抗性細(xì)胞株形成,轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-hNEP及pcDNA3.1-inNEP(E585V)的細(xì)胞NEP表達(dá)均增高.結(jié)論:獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-hNEP及pcDNA3.1-inNEP(E585V)的細(xì)胞株.

作 者： 孔峰 胡曉燕 楊玲玲 丁巖 王麗娜 崔行 KONG Feng HU Xiao-yan YANG Ling-ling DING Yan WANG Li-na CUI Xing   作者單位： 山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究所,山東,濟(jì)南,250012  刊 名： 山東大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)  年，卷(期)： 2006 44(2)  分類號： Q785  關(guān)鍵詞： 中性內(nèi)肽酶   阿爾茨海默病   基因治療   轉(zhuǎn)染   細(xì)胞轉(zhuǎn)化,腫瘤  

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