金黃色葡萄球菌外毒素B特異性適體的篩選及其應用

目的:利用指數(shù)富集配基的系統(tǒng)進化(SELEX)技術,篩選能與金黃色葡萄球菌外毒素B(SEB)特異、高親和力結合的單鏈DNA(ssDNA)適體,并將該適體應用于患者血清標本的檢測.方法:從體外合成的96核苷酸隨機ssDNA文庫中,以羧基磁珠作為篩選介質,經(jīng)逐步PCR擴增、篩選,獲得針對SEB的高親和力、高特異性適體;利用熒光素標記適體測定篩選過程中各輪結合力;利用酶連接適體方法檢測適體特異性和結合力.結果:經(jīng)過13輪篩選,ssDNA文庫與SEB的結合百分率從1.1%提高到39.8%,增加了36倍;獲得的ssDNA適體(A11)針對SEB的特異性強,與金黃色葡萄球菌表面蛋白A(SPA)結合低,并能初步識別患者血清.結論:利用SELEX技術篩選獲得了特異結合SEB的高親和力的ssDNA適體,為金黃色葡萄球菌的臨床診斷與治療奠定了基礎.

作 者： 甘龍杰 蘭小鵬 江麗 馬立強 GAN Long-Jie LAN Xiao-Peng JIANG li MA Li-Qiang   作者單位： 甘龍杰,江麗,GAN Long-Jie,JIANG li(福建醫(yī)科大學,福州總醫(yī)院臨床醫(yī)學院,福建,福州,350025)

蘭小鵬,LAN Xiao-Peng(福建醫(yī)科大學,福州總醫(yī)院臨床醫(yī)學院,福建,福州,350025;南京軍區(qū)福州總醫(yī)院,全軍醫(yī)學檢驗研究所,福建,福州,350025)

馬立強,MA Li-Qiang(南京軍區(qū)福州總醫(yī)院,全軍醫(yī)學檢驗研究所,福建,福州,350025) 

刊 名： 生物技術通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2010 21(2)  分類號： Q789  關鍵詞： 指數(shù)富集的配體系統(tǒng)進化技術   金黃色葡萄球菌外毒素B   適體  

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