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B72和hTERT的真核表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定

時間:2023-04-27 21:59:48 生物醫(yī)學(xué)論文 我要投稿
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B72和hTERT的真核表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定

目的:構(gòu)建同時表達(dá)B72和hTERT的真核表達(dá)載體.方法:根據(jù)GenBank中的序列,對B72、hTERT各設(shè)計一對兩端帶特定限制性酶切位點(diǎn)的引物,分別從乳腺組織、乳癌組織提取總RNA,進(jìn)行RT-PCR后,將2擴(kuò)增產(chǎn)物分別克隆在pGEM-T載體,然后雙酶切各pGEM-T載體,回收目的片段,將2目的片段再克隆至真核表達(dá)質(zhì)粒pEGFP-C3中,并對重組體進(jìn)行PCR鑒定和測序分析.結(jié)果:PCR擴(kuò)增片段與預(yù)期結(jié)果相符,B72/hTERT真核表達(dá)載體構(gòu)建成功,插入片段測序結(jié)果與GenBank公布的基因一致.結(jié)論:成功構(gòu)建B72/hTERT真核表達(dá)載體.

作 者: 丁麗 趙國強(qiáng) 范清堂 DING Li ZHAO Guoqiang FAN Qingtang   作者單位: 丁麗,DING Li(鄭州鐵路職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)分院檢驗系,鄭州,450052)

趙國強(qiáng),ZHAO Guoqiang(鄭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)與免疫學(xué)教研室,鄭州,450052)

范清堂,FAN Qingtang(河南省分子醫(yī)學(xué)重點(diǎn)學(xué)科開放實驗室,鄭州,450052) 

刊 名: 鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)  ISTIC PKU 英文刊名: JOURNAL OF ZHENGZHOU UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)  年,卷(期): 2006 41(3)  分類號: Q782  關(guān)鍵詞: B72   hTERT   真核表達(dá)載體  

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