超耐熱酸性α-淀粉酶基因在多型漢遜酵母中表達(dá)及與在畢赤酵母中表達(dá)的比較研究

利用畢赤酵母的質(zhì)粒載體pPIC9K將極端耐熱古菌Pyrococcus furiosus的超耐熱酸性α-淀粉酶 (Amy) 基因轉(zhuǎn)化到多型漢遜酵母HP-6中,獲得重組漢遜酵母.經(jīng)過甲醇進(jìn)行誘導(dǎo),表達(dá)產(chǎn)物的酶活性檢測(cè)和SDS-PAGE電泳,證明α-淀粉酶(Amy)在多型漢遜酵母中利用AOX1啟動(dòng)子和α-因子信號(hào)肽有效表達(dá)并分泌到胞外.該酶的最適反應(yīng)溫度為90～100℃,最適作用pH為4.0～5.0,較之重組畢赤酵母的最適作用pH還低0.5.此外與畢赤酵母的重組蛋白相比,重組漢遜酵母α-淀粉酶不僅菌株篩選簡(jiǎn)便、周期短,而且具有更容易篩選到高拷貝轉(zhuǎn)化子以及適用于大規(guī)模工業(yè)發(fā)酵等優(yōu)點(diǎn).

作 者： 郝帥 郭建強(qiáng) 李運(yùn)敏 岳麗麗 矯慶華 HAO Shuai GUO Jian-Qiang LI Yun-Min YUE Li-Li JIAO Qing-Hua   作者單位： 郝帥,HAO Shuai(中國(guó)科學(xué)院微生物研究所,北京,100080;中國(guó)科學(xué)院研究生院,北京,100049)

郭建強(qiáng),GUO Jian-Qiang(三元基因有限公司,北京,100083)

李運(yùn)敏,岳麗麗,LI Yun-Min,YUE Li-Li(VA Medical Centre 111C5,Department of Medicine University of California at San Francico 4150 Clement Street,San Francisco,CA 94121,USA)

矯慶華,JIAO Qing-Hua(中國(guó)科學(xué)院微生物研究所,北京,100080) 

刊 名： 菌物學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： MYCOSYSTEMA  年，卷(期)： 2006 25(4)  分類號(hào)： Q939.97  關(guān)鍵詞： Pyrococcus furiosus   AOX1啟動(dòng)子   MOX啟動(dòng)子   α-因子信號(hào)肽  

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