耐熱果膠裂解酶基因pel9A的克隆和表達(dá)

利用PCR技術(shù)從耐熱梭狀芽孢桿菌(Clostridium stercorarium)中擴(kuò)增得到產(chǎn)耐熱果膠裂解酶的結(jié)構(gòu)基因pel9A,并將其克隆于表達(dá)載體pET28a中,最后將此重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到受體菌E.coli BL-21中進(jìn)行表達(dá).誘導(dǎo)條件為:37 ℃誘導(dǎo)5 h,IPTG濃度為0.8 mmol/L.重組菌經(jīng)IPTG誘導(dǎo)和SDS-PAGE分析表達(dá)的蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量為130 000,與預(yù)期相對(duì)分子質(zhì)量相符.細(xì)胞經(jīng)超聲破碎后,測(cè)得果膠酶的比酶活為15 U/mg粗蛋白.

作 者： 甄東曉 王樹(shù)英 嚴(yán)群 李華鐘 ZHEN Dong-xiao WANG Shu-ying YAN Qun LI Hua-zhong   作者單位： 甄東曉,嚴(yán)群,ZHEN Dong-xiao,YAN Qun(江南大學(xué),工業(yè)生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇,無(wú)錫,214036)

王樹(shù)英,WANG Shu-ying(江南大學(xué),分析測(cè)試中心,江蘇,無(wú)錫,214036)

李華鐘,LI Hua-zhong(江南大學(xué),工業(yè)生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇,無(wú)錫,214036;江南大學(xué),醫(yī)學(xué)系,江蘇,無(wú)錫,214036) 

刊 名： 食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 25(3)  分類號(hào)： Q557  關(guān)鍵詞： 果膠裂解酶   耐熱梭狀芽孢桿菌   重組質(zhì)粒   大腸桿菌BL-21   表達(dá)  

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