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一種通用高效的復雜載體構(gòu)建的新方法
文章報道了一種簡便、通用、高效的復雜載體構(gòu)建方法.此法是在PCR引物設(shè)計時,在目的片段5′端加上隨機設(shè)計的接頭,利用PCR克隆目的片段,再用T4 DNA聚合酶3′→5′外切酶活性處理PCR克隆目的片段,產(chǎn)生多個首尾相匹配的黏性末端,進行多片段定向連接、轉(zhuǎn)化、重組子鑒定.以7片段拼接的水稻單交換質(zhì)體定點整合表達載體pRSMGA的構(gòu)建為例,應(yīng)用上述方法構(gòu)建只需做兩次連接、轉(zhuǎn)化,且其重組、轉(zhuǎn)化效率高.數(shù)10次實驗證明:這是一種簡便、通用、高效的復雜構(gòu)建載體的方法,該法至今尚未見報道.
作 者: 陸云華 馬立新 蔣思婧 LU Yun-Hua MA Li-Xin JIANG Si-Jing 作者單位: 陸云華,LU Yun-Hua(湖北大學生命科學院分子微生物與基因工程實驗室,武漢,430062;宜春學院生物工程系,江西,宜春,336000)馬立新,蔣思婧,MA Li-Xin,JIANG Si-Jing(湖北大學生命科學院分子微生物與基因工程實驗室,武漢,430062)
刊 名: 遺傳 ISTIC PKU 英文刊名: HEREDITAS(BEIJING) 年,卷(期): 2006 28(2) 分類號: Q78 關(guān)鍵詞: 復雜載體構(gòu)建 新方法 T4 DNA聚合酶 水稻【一種通用高效的復雜載體構(gòu)建的新方法】相關(guān)文章:
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