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乙肝病毒X基因重組腺病毒載體的構(gòu)建
目的 為了探討HBx基因與肝癌發(fā)生的關(guān)系,構(gòu)建HBx基因重組腺病毒載體.方法 應(yīng)用pAdEasyTM腺病毒載體系統(tǒng),首先從質(zhì)粒pCDNA3.l-HBx中酶切得到HBx基因,插入腺病毒穿梭質(zhì)粒pAdTrack-CMV中,得到pAdTrack-CMV-HBx,將其PmeⅠ酶切線性化后,轉(zhuǎn)到含腺病毒骨架質(zhì)粒pAdEasy-1的BJ5183感受態(tài)細(xì)菌中,通過同源重組得到重組腺病毒質(zhì)粒載體pAd-HBx,經(jīng)PacⅠ酶切線性化后轉(zhuǎn)染人胚腎293細(xì)胞,產(chǎn)生重組腺病毒顆粒Ad-HBx.結(jié)果 PCR和酶切鑒定證明重組腺病毒Ad-HBx構(gòu)建成功,在轉(zhuǎn)染的293細(xì)胞中可以觀察到綠色熒光蛋白GFP.結(jié)論 成功構(gòu)建了攜帶HBx基因的重組腺病毒載體,為后續(xù)研究奠定了基礎(chǔ).
作 者： 史震 李向陽 周峰 李金龍 尤紅娟 湯仁仙 SHI Zhen LI Xiangyang ZHOU Feng LI Jinlong YOU Hongjuan TANG Renxian 作者單位： 徐州醫(yī)學(xué)院微生物與免疫學(xué)教研室,江蘇,徐州,221002 刊 名： 徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào) ISTIC 英文刊名： ACTA ACADEMIAE MEDICINAE XUZHOU 年，卷(期)： 2010 30(3) 分類號： Q782 R512.6+2 關(guān)鍵詞： 乙型肝炎病毒 HBx基因 腺病毒載體【乙肝病毒X基因重組腺病毒載體的構(gòu)建】相關(guān)文章：
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