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小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子基因的克隆及真核表達載體的構(gòu)建
目的:分別構(gòu)建野生型和截短型小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)基因的真核表達載體.方法:通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)擴增小鼠CNTF野生型全長編碼序列,體外定點突變獲取截短型CNTF的互補DNA(cDNA)編碼序列,將上述兩序列分別克隆至pGEM-TEasy載體,經(jīng)限制性內(nèi)切酶EcoRⅠ和XbaⅠ雙酶切后,將野生型和截短型CNTF基因連入pTracer-CMV真核表達載體,DNA測序鑒定.結(jié)果:PCR成功擴增了野生型和截短型CNTF基因,DNA序列分析證實兩種真核表達載體中的CNTF序列與Gene Bank中目的序列一致.結(jié)論:野生型和截短型CNTF基因真核表達載體的成功構(gòu)建為視網(wǎng)膜色素變性(RP)的基因治療研究奠定了基礎(chǔ).
作 者: 袁松濤 左愛軍 李寧東 梁東春 趙堪興 YUAN Songtao ZUO Aijun LI Ningdong LIANG Dongchun ZHAO Kanxing 作者單位: 袁松濤,YUAN Songtao(300070,天津醫(yī)科大學(xué);天津市眼科醫(yī)院)左愛軍,梁東春,ZUO Aijun,LIANG Dongchun(天津市內(nèi)分泌研究所)
李寧東,LI Ningdong(天津市眼科醫(yī)院)
趙堪興,ZHAO Kanxing(300070,天津醫(yī)科大學(xué))
刊 名: 天津醫(yī)藥 ISTIC PKU 英文刊名: TIANJIN MEDICAL JOURNAL 年,卷(期): 2006 34(7) 分類號: Q3 關(guān)鍵詞: 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子 基因克隆 真核表達載體 視網(wǎng)膜色素變性 小鼠【小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子基因的克隆及真核表達載體的構(gòu)建】相關(guān)文章:
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