重組質(zhì)粒pYES-GFP mRNA在動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的研究

目的 提取重組釀酒酵母 mRNA,并對(duì)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染,為進(jìn)一步探索證明重組釀酒酵母 mRNA可以作為基因治療物質(zhì)提供依據(jù).方法 利用酶法制備重組釀酒酵母的原生質(zhì)體后提取其總RNA.對(duì)提取的總RNA純化后利用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)擴(kuò)增,鑒定GFP基因的正確無(wú)誤后,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染綠猴腎細(xì)胞COS-7.在光顯微鏡下觀察綠色熒光的發(fā)生.結(jié)果 成功制備重組釀酒酵母原生質(zhì)體,克隆鑒定基因片段正確.轉(zhuǎn)染細(xì)胞后有綠色熒光出現(xiàn),能夠表達(dá)目標(biāo)基因.結(jié)論 成功制備了重組釀酒酵母原生質(zhì)體,提取的mRNA能夠在動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá).證實(shí)重組釀酒酵母 mRNA可以作為基因治療物質(zhì),能達(dá)到基因治療的目的 .

作 者： 王身相 白玲 鄭文嶺 WANG Shenxiang BAI Ling ZHENG Wenling   作者單位： 王身相,WANG Shenxiang(江西農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院,南昌市,330045;華南基因組研究中心,廣州市,510800)

白玲,BAI Ling(江西農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院,南昌市,330045)

鄭文嶺,ZHENG Wenling(華南基因組研究中心,廣州市,510800) 

刊 名： 醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF MEDICAL MOLECULAR BIOLOGY  年，卷(期)： 2008 5(3)  分類(lèi)號(hào)： Q786  關(guān)鍵詞： 重組釀酒酵母   GFP   表達(dá)  

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