研究生論文常用生化儀器使用方法

分光光度計的基本工作原理是基于物質(zhì)對光(對光的波長)的吸收具有選擇性，不同的物質(zhì)都有各自的吸收光帶，所以，當(dāng)光色散后的光譜通過某一溶液時，其中某些波長的光線就會被溶液吸收。在一定的波長下，溶液中物質(zhì)的濃度與光能量減弱的程度有一定的比例關(guān)系，即符合比爾定律。

T = I/Io lg(Io/I)=εcb

式中，T為透過率，Io為入射光強(qiáng)度，I為透射光強(qiáng)度，A為消光值(吸光度)，ε為吸收系數(shù)，b為溶液的光徑長度，c為溶液的濃度。從以上公式可以看出，當(dāng)入射光、吸收系數(shù)和溶液厚度一定時，透光率是根據(jù)溶液的濃度而變化的。

721型分光光度計的構(gòu)造

721型分光光度計允許的測定波長范圍在360～800nm，其構(gòu)造比較簡單，測定的靈敏度和精密度較高。因此，應(yīng)用比較廣泛。

721型分光光度計的儀器構(gòu)造見下圖。

從光源燈發(fā)出的連續(xù)輻射光線，射到聚光透鏡上，會聚后，再經(jīng)過平面鏡轉(zhuǎn)角90°，反射至入射狹縫。由此入射到單色器內(nèi)，狹縫正好位于球面準(zhǔn)直物鏡的焦面上，當(dāng)入射光線經(jīng)過準(zhǔn)直物鏡反射后，就以一束平行光射向棱鏡。光線進(jìn)入棱鏡后，進(jìn)行色散。色散后回來的光線，再經(jīng)過準(zhǔn)直鏡反射，就會聚在出光狹縫上，再通過聚光鏡后進(jìn)入比色皿，光線一部分被吸收，透過的光進(jìn)入光電管，產(chǎn)生相應(yīng)的光電流，經(jīng)放大后在微安表上讀出。

721型分光光度計的使用方法

①首先接通電源，打開電源開關(guān)1，指示燈亮，打開比色皿暗箱蓋8，預(yù)熱20分鐘。 ②波長選擇旋鈕6，選擇所需的單色光波長，用靈敏度旋鈕2選擇所需的靈敏檔。

③放入比色皿，旋轉(zhuǎn)零位旋鈕5調(diào)零，將比色皿暗箱蓋合上，推進(jìn)比色皿拉桿3，使參比比色皿處于空白校正位置，使光電管見光，旋轉(zhuǎn)透光率調(diào)節(jié)旋鈕4，使微安表9指針準(zhǔn)確處于100%。按上述方法連續(xù)幾次調(diào)整零位和100%位，即可進(jìn)行測定工作(儀器面板見 圖5-6)。 721型分光光度計使用和維護(hù)中應(yīng)注意事項：

①連續(xù)使用儀器的時間不應(yīng)超過2小時，最好是間歇0.5小時后，再繼續(xù)使用。

②比色皿每次使用完畢后，要用去離子水洗凈并倒置晾干后，存放在比色皿盒內(nèi)。在日常使用中應(yīng)注意保護(hù)比色皿的透光面，使其不受損壞或產(chǎn)生劃痕，以免影響透光率。

③儀器不能受潮。在日常使用中，應(yīng)經(jīng)常注意單色器上的防潮硅膠(在儀器的底部)是否變色，如硅膠的顏色已變紅，應(yīng)立即取出烘干或更換。

④在托運(yùn)或移動儀器時，應(yīng)注意小心輕放。

低溫高速離心機(jī)使用說明及注意事項

一、使用說明

1.此儀器無論何時使用，需經(jīng)管理員同意。

2.每次儀器使用都需登記。

3.離心樣品密度要相同，樣品體積要求離試管口3mm處

4.將www.wenku1.com配平、密度相同、管壁干燥的離心管對稱放入吊桶內(nèi)，旋。緊對應(yīng)的吊桶帽，懸掛到對應(yīng)的吊桶架上，空吊桶也要懸掛。

5.打開儀器電源開關(guān)。

6.用腳踩住踏板,同時用手按住指定位置，門蓋將自動打開。

7.將懸掛吊桶的轉(zhuǎn)頭向下筆直輕放于驅(qū)動軸套上，要確保牢固性。

8.旋緊轉(zhuǎn)頭蓋。

9.手按住指定位置將門蓋壓下去。

10.設(shè)置離心參數(shù)：轉(zhuǎn)頭型號、轉(zhuǎn)速、溫度、時間，升降速度頻率。

11.參數(shù)設(shè)置確認(rèn)無誤，按ENTER，START 。

12.離心機(jī)達(dá)到設(shè)定轉(zhuǎn)速5分鐘后，使用者方可離開。離心中途需觀察儀器運(yùn)轉(zhuǎn)是否正常。

13.離心結(jié)束（或按STOP結(jié)束運(yùn)行），轉(zhuǎn)頭停止運(yùn)轉(zhuǎn)后，打開門蓋，旋松轉(zhuǎn)頭蓋，將轉(zhuǎn)頭取 出放到專用架上。

14.取出吊桶，旋松吊桶帽，將樣品取出。

15.吊桶及吊桶帽敞開放在指定位置，如有漏夜，取出密封圈，洗凈后再倒置放在桌布上。

16.關(guān)閉儀器電源。

17.腔體內(nèi)冷凝水擦凈。

18.腔體溫度與室溫相同時關(guān)閉門蓋。

注意事項：冷凍離心需要預(yù)冷時，離心機(jī)在所需溫度下每分鐘2000轉(zhuǎn)離心3～5分鐘。

二、注意事項

1.儀器使用前請詳閱此說明書，以免誤操作。

2.將儀器安放在堅固平整的臺面上，以免運(yùn)轉(zhuǎn)時產(chǎn)生不必要的麻煩。

3.有機(jī)玻璃蓋上面不能堆物，以免壓壞或出現(xiàn)高低不平，影響儀器的使用效果。

4.儀器在高速旋轉(zhuǎn)時切不隨意打開有機(jī)玻璃蓋門。

5.電源線的插頭，一端插入儀器背面的插座內(nèi)，另一端與外電網(wǎng)插座連接。

注：儀器不用時，請將與外電網(wǎng)相連的一端卸下。

6.儀器在操作時必須遵守操作程序中第5條的規(guī)定，否則會使電機(jī)燒壞，無法使用。

7.使用前必須經(jīng)常檢查離心管是否有裂紋，老化等現(xiàn)象，如有應(yīng)及時更換。

8.使用完畢，將轉(zhuǎn)頭和儀器擦干凈，以防試液沾污而產(chǎn)生腐蝕。

9.如樣品比重超過1.2克/立方厘米，最高轉(zhuǎn)速必須按下式修正：

n=nMax×1.2÷樣品比重

nMax??極限轉(zhuǎn)速

10.當(dāng)電機(jī)碳刷長度小于6mm時必須及時更換。

紫外分光光度計752型

【價格】9980元

【說明】

紫外分光光度計752/752N型產(chǎn)品優(yōu)勢：

1、采用1200條/mm高性能紫外專用光柵、進(jìn)口鎢燈、大規(guī)模集成數(shù)字電路、新型的單色器結(jié)構(gòu)使儀器

更加穩(wěn)定可靠。

2、自動調(diào)0%，調(diào)100%，T、A的無誤差轉(zhuǎn)換使用簡便。

3、超大的樣品室，可選購放置100mm比色皿，特別適合電廠、糖廠進(jìn)行微量分析。

4、提供RS232接口，可連接計算機(jī)或者直接連接打印機(jī)。

自動生化

分析儀的原理、

構(gòu)成及使

用

一、自

動生化分

析儀的功能及

特點 自動生化

分析儀是將生化分析中的取樣、加試劑、混合、保溫、比色、結(jié)果計算、書寫報告等步驟的部分或全部由模仿手工操作的儀器來完成。它可進(jìn)行定時法、連續(xù)監(jiān)測法等各種反應(yīng)類型的分析測定。除了一般的生化項目測定外，有的還可進(jìn)行激素、免疫球蛋白、血藥濃度等特殊

化合物的測定以及酶免疫、熒光免疫等分析方法的應(yīng)用。它具有快速、簡便、靈敏、準(zhǔn)確、標(biāo)準(zhǔn)化、微量等特點。

二、自動生化分析儀的分類

自動生化分析儀有多種分類方法，最常用的是按其反應(yīng)裝置的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分類。按此法可將自動生化分析儀分為流動式和分立式兩大類。

所謂流動式自動生化分析儀是指測定項目相同的各待測樣品與試劑混合后的化學(xué)反應(yīng)在同一管道流動的過程中完成。這是第一代自動生化分析儀。過去說得多少通道的生化分析儀指的就是這一類。存在較嚴(yán)重的交叉污染，結(jié)果不太準(zhǔn)確，現(xiàn)已淘汰。

分立式自動生化分析儀與流動式的主要差別是每個待測樣品與試劑混合間的化學(xué)反應(yīng)都是分別在各自的反應(yīng)皿中完成的，不易出現(xiàn)較差污染，結(jié)果可靠。

三、自動生化分析儀的構(gòu)成

因為自動生化分析儀是模仿手工操作的過程，所以無論哪一類的自動生化分析儀，其結(jié)構(gòu)組成均與手工操作的一些器械設(shè)備相似，一般可有以下幾個部分組成：

1、樣品器：放置待測樣本、標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控液、空白液和對照液等。

2、取樣裝置：包括稀釋器、取樣探針和輸送樣品和試劑的管道等。

3、反應(yīng)池或反應(yīng)管道：一般起比色皿（管）的作用。

4、保溫器：為化學(xué)反應(yīng)提供恒定的溫度。

5、檢測器：如比色計、分光光度計、熒光分光光度計、火焰光度計、電化學(xué)測定儀等。不同儀器配置不同。

6、微處理器：是分析儀的電腦部分，又叫程序控制器�？刂苾x器所有的動作和功能，使用者可通過鍵盤與儀器“對話”，同時電腦還能接受從各部件反饋來的信號，并作出相應(yīng)的反應(yīng)，對異常情況發(fā)出一定的指示信號。分析軟件和分析結(jié)果一般貯存在磁盤中，可共查詢。

7、打印機(jī)：可繪制反應(yīng)動態(tài)曲線和打印檢驗報告單等。

8、功能監(jiān)測器：顯示屏就是其中一部分，可查看反應(yīng)狀態(tài)、人機(jī)“對話”的情況、當(dāng)前儀器工作狀態(tài)、分析結(jié)果等。

四、流動式自動生化分析儀

流動式自動生化分析儀又可分為空氣分段系統(tǒng)和非分段系統(tǒng)。前者是流動式分析儀中最典型的一種。

（一）空氣分段系統(tǒng)

這種分析儀的特點是通過比例定量泵擠壓彈性樣品管、空氣管和試劑管（通稱“泵管”），將樣品依次連續(xù)地吸入并沿樣品管輸送，另一方面由空氣管吸入的氣泡將由同樣原理吸入并在試劑管道中連續(xù)流動的試劑分成均勻的節(jié)段，樣品流和試劑流在連續(xù)向前流動的過程中相遇、混合、透吸（必要時）、保溫、反應(yīng)及被測定。整個分析過程是液流在管道中連續(xù)流動的過程中完成的。

（二）非分段系統(tǒng)

非分段系統(tǒng)是靠試劑空白或緩沖液來間隔每個樣品的反應(yīng)液，這樣，在管道中連續(xù)流動的液體不被分段。非分段系統(tǒng)可再分為流動注入系統(tǒng)和間隙系統(tǒng)。

1、流動注入系統(tǒng)：該系統(tǒng)的組成與空氣分段系統(tǒng)相似，但某些結(jié)構(gòu)和工作原理有所不同，空氣分段系統(tǒng)是利用氣泡分段來防止管各反應(yīng)液在流動過程中的交叉污染，而流動注入系統(tǒng)則是通過將樣品依次注入連續(xù)流動的試劑流管道中來達(dá)到防止交叉污染的目的的。

2、間隙系統(tǒng)：該系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)、組成和工作原理與流動注入系統(tǒng)相似，但其特點是每一次進(jìn)樣都必須在前一樣品的分析過程結(jié)束后（包括管道的清洗）才能開始，而不能連續(xù)地依次進(jìn)樣，每次進(jìn)樣間有一時間間隙，故有人稱為不連續(xù)流動式分析儀。

五、分立式自動生化分析儀

分立式為第二代自動生化分析儀，它與流動式的主要差別是每個待測樣品與試劑混合間的化學(xué)反應(yīng)都是分別在各自的反應(yīng)皿中完成的。

稱為第三代自動生化分析儀的離心式自動生化分析儀，也應(yīng)屬于分立式。因為在離心式分析儀中，每個待測樣品都是在離心力作用下，在各自的反應(yīng)槽內(nèi)與試劑混合，并完成化學(xué)反應(yīng)，繼而被測定的。離心式分析儀屬于“同步分析”，在離心力的作用下，各待測樣品幾乎同時與試劑混合、反應(yīng)并被測定后打出報告；而其它分析儀是“順序分析”，即各待測樣品依次與試劑混合、反應(yīng)先后被測定。

袋式自動生化分析儀也應(yīng)屬于分立式，它是用試劑袋代替反應(yīng)管和比色皿，測定時每個待測樣品在各自的試劑袋內(nèi)進(jìn)行反應(yīng)并被檢測。還有一種稱為“干式自動生化分析儀”也屬于分立式。它的主要特點是采用固相化學(xué)技術(shù)，即將試劑固相于膠片或濾紙小片等載體上。測定時使一定量的待測樣品分布于一張試紙片上，一定時間后用反射光度計測定。

分立式自動生化分析儀，是目前各實驗室普遍使用的自動生化分析儀，一般都可以任意選擇測定項目，故稱為任選式自動生化分析儀。下面將重點介紹任選式自動生化分析儀。

六、任選式自動生化分析儀的主要部件

（一）加樣系統(tǒng)

1、樣品轉(zhuǎn)盤：可放置小型樣品杯數(shù)十只。有的分析儀可直接用盛樣本的試管，有的還附有條形碼閱讀裝置，能識別樣本試管上的條形碼信息，不需給樣本編號，也不必輸入病人資料即可打印出該病人的化驗報告。

2、試劑室（倉）：不同的分析儀試劑室可容納的試劑盒數(shù)量不同，一般可容納20多種試劑。有的試劑室?guī)в欣洳匮b置，帶有條形碼識別裝置的試劑室試劑可以任意放置試劑盒位置。

3、取樣裝置：有的分析儀取樣本和取試劑公用同一采樣針，由內(nèi)部的分流閥控制取樣本和取試劑；有的儀器有兩套取樣裝置，分別取樣本和取試劑。采樣針前端有液面?zhèn)鞲衅鞣乐箍瘴�或采樣針外壁液體掛淋，采樣臂中有預(yù)溫裝置。如果采用多試劑分析方法，將占用試劑室中試劑盒位置，會減少測定項目。

（二）比色系統(tǒng)

1、光源：大多數(shù)分析儀使用鹵素鎢絲燈，工作波長325～800nm。有的分析儀使用氙燈，工作波長285～750nm。

2、比色杯：有分立式比色杯、分立式轉(zhuǎn)盤式比色杯、離心式比色盤、流動池。干式生化儀不需要比色杯，袋式生化儀由試劑袋經(jīng)擠壓自動形成比色杯。比色杯光徑6-7mm，少數(shù)為10mm。 （閱讀次數(shù)： 3115）

比色杯中的反應(yīng)液需要恒溫，有37℃、30℃、25℃三檔可選擇，有的固定為37℃。多數(shù)用吹入恒溫空氣的方式，也有用恒溫水浴或半導(dǎo)體溫控裝置的。

為了保證比色杯中反應(yīng)液有±0.1℃的精確度，分析儀的環(huán)境溫度必需保持18～30℃，室溫波動不宜超過2℃。

3、單色器：（1）干涉濾光片（2）光柵

4、檢測器：（1）光電倍增管，已很少用。（2）列陣固態(tài)光敏二極管。

（三）供排水系統(tǒng)

自動生化分析儀中有很多供水管道與電磁閥。只讀存儲器中軟件參數(shù)控制電磁閥與輸液泵供給各個部件的沖洗與吸液，最后排出機(jī)外。隨機(jī)存儲器內(nèi)的分析參數(shù)控制電磁閥與注射器的步進(jìn)電機(jī)，供應(yīng)樣本、試劑和稀釋用水。有的生化儀還能自動沖洗比色杯供反復(fù)使用。 醫(yī)

（四）數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)

每個項目的檢測結(jié)果暫時儲存在隨機(jī)存儲器中，待某個樣本所需的項目全部檢測完畢，由微

機(jī)匯總打印出綜合報告單。微機(jī)的存儲器中可以存儲相當(dāng)數(shù)量的病人數(shù)據(jù)與逐日的室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)，隨時可以按指令調(diào)出，在熒光屏上顯示或打印，也可存儲在軟盤中長期保存，隨時調(diào)閱。

七、任選式自動生化分析儀的分析順序

每份樣品可以任選試劑室內(nèi)預(yù)置試劑盒的一項或全部項目的檢測。微機(jī)按輸入的指令，安排項目檢測次序，一般先做孵育時間長的終點法，后做監(jiān)測時間短的速率法，以便恒速打印綜合報告單。當(dāng)指定樣本進(jìn)入待測位置時，微機(jī)指令試劑盒進(jìn)入試劑取樣位置，按所測項目的參數(shù)由加樣系統(tǒng)定量取樣，同時比色杯按微機(jī)的指令到達(dá)指定位置加樣。生化儀的分析速度與儀器加樣周期的時間有關(guān)。加樣周期的時間越短分析儀的速度越快。雙試劑法占用兩個加樣周期，分析速度減半。

八、任選式自動生化分析儀的主要分析參數(shù)

1、試驗代號 14、連續(xù)監(jiān)測時間

2、試驗名稱 15、標(biāo)準(zhǔn)液數(shù)量

3、試驗方法 16、標(biāo)準(zhǔn)液濃度

4、試驗類型 17、重復(fù)校標(biāo)次數(shù)

5、溫度 18、計算因子（F值）

6、波長：可選擇主波長和次波長。 19、計量單位

7、反應(yīng)類型 20、小數(shù)點位數(shù)

8、終點法零點讀數(shù) 21、底物耗盡

9、樣本量與稀釋水量 22、線性度

10、試劑量與稀釋水量 23、試劑吸光度上限與下限

11、樣本空白 24、線性范圍

12、孵育時間 25、參考范圍 13、延遲時間 26、等等等等

九、任選式自動生化分析儀分析參數(shù)的使用

（一）儀器廠家提供的測定項目

1、著名儀器公司自己生產(chǎn)常用項目試劑盒、定標(biāo)液（定值血清型標(biāo)準(zhǔn)液）與定值質(zhì)控血清，提供30種左右常用項目的分析參數(shù)，供用戶直接使用。另外還有數(shù)十個空白項目參數(shù)表，由用戶自己開發(fā)新項目。

2、有的著名儀器公司自己不提供試劑盒，但有合作的試劑公司，由合作試劑公司提供分析參數(shù)。因此，在購買儀器時必須購買一定數(shù)量指定試劑公司的試劑盒（包括定標(biāo)液與定值質(zhì)控血清）。

3、小型儀器公司既不生產(chǎn)試劑盒，也沒有合作試劑公司，分析參數(shù)表是空的，需要用戶自己設(shè)計分析參數(shù)，因此難度很大。不過國內(nèi)代理商一般提供他們的設(shè)計參數(shù)，往往個別參數(shù)不恰當(dāng)，用戶自己應(yīng)逐條核實。

（二）最好使用廠家的原裝參數(shù)

1、原裝分析參數(shù)不應(yīng)修改，僅計量單位要選用我國法定單位。用原公司指定的試劑盒、定標(biāo)液與定值質(zhì)控血清作室內(nèi)質(zhì)量控制，除非分析儀沒有調(diào)試好或有故障，一般能一次通過。

2、不同公司的定標(biāo)液在定值時所用原始標(biāo)準(zhǔn)的來源不同，其定值可以稍有差異。方法學(xué)相同的試劑盒配方也有差異，所以其它公司的定標(biāo)液或用水劑標(biāo)準(zhǔn)液作儀器定標(biāo)，使用非指定試劑盒作質(zhì)控，測得的數(shù)值與質(zhì)控血清的的預(yù)計值會有差異，這種情況不表示原裝分析參數(shù)不合適。

3、國產(chǎn)試劑盒的產(chǎn)品質(zhì)量已大有提高，可選擇方法學(xué)相同的優(yōu)質(zhì)國產(chǎn)試劑盒與原公司指定試劑盒作并行檢測，實驗樣品應(yīng)包括低值和高值，結(jié)果作相關(guān)分析。符合要求的可以使用。少數(shù)項目的方法學(xué)沒有符合要求的國產(chǎn)試劑盒，只有另行安排該項目的國產(chǎn)試劑分析參數(shù)。但原參數(shù)要保留或備份，等待合格的國產(chǎn)試劑盒出現(xiàn)。

4、不論用原公司或國產(chǎn)試劑盒，原分析參數(shù)不應(yīng)隨意修改，尤其是主要參數(shù)；如血清試劑比(包括稀釋水量）、孵育時間、延遲時間、檢測時間，因為這些參數(shù)一旦改變，線性范圍和各種限額參數(shù)都將發(fā)生改變，嚴(yán)重影響測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

5、雙試劑兩步法的方法學(xué)有很多優(yōu)點，如果分析儀為雙試劑式，最好用雙試劑兩步法。

6、底物耗盡參數(shù)不能刪去，否則高濃度結(jié)果出現(xiàn)低值；線性范圍如果刪去，高濃度結(jié)果也會偏低；試劑吸光度上下限如被刪去，分析儀將接受變質(zhì)試劑。

（三）自己設(shè)計分析參數(shù)的原則

如果儀器公司不提供分析參數(shù)或測定項目的方法學(xué)不同，可以自己設(shè)置分析參數(shù)。主要設(shè)計以下幾個參數(shù)。

1、樣本試劑比例。 6、計算因子。

2、孵育時間。 7、底物耗盡限額。

3、延遲時間。 8、線性度。

4、監(jiān)測時間。 9、線性范圍。

5、試劑吸光度上下限。

以上這些參數(shù)試劑盒說明書一般都會提供，可按此填入分析參數(shù)表，定標(biāo)后即可進(jìn)行日常工作，有些參數(shù)在以后的工作中逐步修正。

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