轉(zhuǎn)鐵蛋白受體單鏈抗體與BDNF融合蛋白的表達(dá)及活性鑒定

腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的多種神經(jīng)元具有營(yíng)養(yǎng)、修復(fù)和保護(hù)功能,但因無(wú)法通過(guò)血腦屏障限制了其應(yīng)用.利用抗轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TfR)的單鏈抗體(ox26-scFv)作為腦轉(zhuǎn)運(yùn)載體,分別擴(kuò)增單鏈抗體和BDNF基因,插入pTIG-Trx載體,構(gòu)建融合基因表達(dá)載體pTIG-Trx/scFv-BDNF,在大腸桿菌BL21(DE3)中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá).經(jīng)Ni-NTA金屬螯合層析柱純化后,在41kDa處可見(jiàn)目的純化條帶.大鼠GH3細(xì)胞免疫酶染色顯示,ScFv-BDNF融合蛋白能與轉(zhuǎn)鐵蛋白受體特異性結(jié)合,同時(shí)能夠促進(jìn)雞胚背根節(jié)神經(jīng)突起的生長(zhǎng),具備了BDNF的生物學(xué)活性.為使BDNF能夠跨越血腦屏障成為中樞神經(jīng)系統(tǒng)的治療藥物打下了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ).

作 者： 顏冰 范明 黃培堂 YAN Bing FAN Ming HUANG Pei-tang   作者單位： 顏冰,黃培堂,YAN Bing,HUANG Pei-tang(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所,北京,100071)

范明,FAN Ming(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所,北京,100850) 

刊 名： 中國(guó)生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(3)  分類(lèi)號(hào)： Q81  關(guān)鍵詞： 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體   單鏈抗體   腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子   血腦屏障  

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