殼聚糖酶的分離純化及性質(zhì)研究

以本實(shí)驗(yàn)室分離的產(chǎn)殼聚糖酶YJ02菌株出發(fā),制備殼聚糖酶發(fā)酵液,經(jīng)離心、(NH4)2SO4分級(jí)鹽析、Q-Sepharose Fast Flow陰離子交換、Sephacry S-100 凝膠過濾分離純化步驟,SDS-PAGE顯示為一條帶,殼聚糖酶純化了28.9倍,收率為47.6%.該酶的性質(zhì)研究表明,該酶的分子量為66.2KD,最適反應(yīng)溫度為50℃,最適反應(yīng)pH為6.0;Mn2+對(duì)酶活力有明顯的促進(jìn)作用,Cu2+,Fe3+,Hg2+對(duì)酶活力有抑制作用;小分子有機(jī)物EDTA和SDS對(duì)酶活力有抑制作用,而IAA和β-巰基乙醇對(duì)酶活力稍有促進(jìn)作用.該殼聚糖酶對(duì)高脫乙酰度殼聚糖底物水解作用強(qiáng),酶解位點(diǎn)可能為NGlc-NGlc,酶最大反應(yīng)速度Vmax=4.1μmol/min,常數(shù)Km為64mmol/L.此殼聚糖酶水解殼聚糖制備的殼寡糖數(shù)均分子量為2 400Da.

作 者： 韓寶芹 菊林 劉萬順 郝日光 HAN Bao-Qin YANG Ju-Lin LIU Wan-Shun HAO Ri-Guang   作者單位： 中國海洋大學(xué)海洋生命學(xué)院,山東,青島,266003  刊 名： 中國海洋大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）  ISTIC PKU 英文刊名： PERIODICAL OF OCEAN UNIVERSITY OF CHINA  年，卷(期)： 2006 36(2)  分類號(hào)： Q503  關(guān)鍵詞： 殼聚糖酶   分離純化   酶學(xué)性質(zhì)   殼寡糖  

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