豇豆胰蛋白酶抑制基因改良大白菜抗蟲性的研究

以8個大白菜親本材料無菌苗為實驗材料,從近生長點處切下無菌苗子葉,在MS+1 mg/L 2,4-D培養(yǎng)基上預培養(yǎng)48 h,以攜帶豇豆胰蛋白酶抑制基因(該基因可賦予大白菜抗菜青蟲和小菜蛾等昆蟲的抗性,Cowpea Trypsin Inhibitor gene,CpTI)的質(zhì)粒pBinΩSCK為載體,通過OD600值約o.3～0.4的根癌農(nóng)桿菌LBA4404侵染3min,在MS+2 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+5 mg/L硝酸銀+2%蔗糖+8 g/L瓊脂培養(yǎng)基上共培養(yǎng)48 h,將其轉到含有卡那霉素和頭孢霉素的篩選培養(yǎng)基中,約4周出現(xiàn)大量轉化體,經(jīng)分子雜交檢測,證明了豇豆胰蛋白酶抑制劑基因整合到了大白菜基因組中,室內(nèi)和田間的抗蟲試驗也表明,豇豆胰蛋白酶抑制劑基因賦予了轉基因大白菜較強的抗蟲能力.本研究還對影響農(nóng)桿菌遺傳轉化效率及植株再生的各種因素進行了優(yōu)化.

作 者： 趙軍良 梁愛華 徐鴻林 朱禎 ZHAO Jun-liang LIANG Ai-hua XU Hong-lin ZHU Zhen   作者單位： 趙軍良,ZHAO Jun-liang(山西大學,化學生物學與分子工程教育部重點實驗室,太原,030006;山西省農(nóng)業(yè)科學院,蔬菜研究所,太原,030031)

梁愛華,LIANG Ai-hua(山西大學,化學生物學與分子工程教育部重點實驗室,太原,030006)

徐鴻林,朱禎,XU Hong-lin,ZHU Zhen(中國科學院,遺傳與發(fā)育研究所,北京,100101) 

刊 名： 西北植物學報  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA  年，卷(期)： 2006 26(5)  分類號： Q785 Q789  關鍵詞： 根癌農(nóng)桿菌   大白菜   豇豆胰蛋白酶抑制劑基因   昆蟲抗性   遺傳轉化   Agrobacterium tumefaciens   Chinese cabbage   CpTI gene   insect resistance   genetic transformation  

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