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TAT-PTD融合蛋白可能存在的跨膜遞送作用機(jī)制

時(shí)間:2023-04-28 15:04:21 生物醫(yī)學(xué)論文 我要投稿
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TAT-PTD融合蛋白可能存在的跨膜遞送作用機(jī)制

為探討TAT-PTD融合蛋白的跨膜遞送作用機(jī)制,采用DNA重組技術(shù)構(gòu)建pGEX-TAT-GFP表達(dá)質(zhì)粒.在E.coli BL21表達(dá)GST-TAT-GFP,并用谷胱甘肽(glutathione)-Sepharose-4B親和柱進(jìn)行純化.GST-TAT-GFP在不同條件下與細(xì)胞的作用結(jié)果表明,GST-TAT-GFP能有效進(jìn)入HeLa、SMMC-7721、L-02和BEL-7402細(xì)胞,GST-TAT-GFP在遞送時(shí)對(duì)時(shí)間和濃度有依賴關(guān)系.同時(shí),溫度對(duì)GST-TAT-GFP跨膜作用具有明顯的影響,GST-TAT-GFP的跨膜作用受代謝抑制劑的影響很小,肝素的存在能明顯抑制GST-TAT-GFP跨膜進(jìn)入細(xì)胞的能力,GST-TAT-GFP對(duì)細(xì)胞活性沒有影響.這些結(jié)果說明,TAT-PTD可能是通過與細(xì)胞表面的硫酸乙酰肝素等受體相結(jié)合介導(dǎo)融合蛋白跨膜遞送進(jìn)入細(xì)胞的.

作 者: 何火聰 劉樹滔 潘劍茹 傅蓉 陳菁 陳躬瑞 饒平凡 HE Huo-Cong LIU Shu-Tao PAN Jian-Ru FU Rong CHEN Jing CHEN Gong-Rui RAO Ping-Fan   作者單位: 何火聰,HE Huo-Cong(福州大學(xué)生物工程研究所,福州,350002;福建省腫瘤醫(yī)院放射生物學(xué)研究室,福州,350014)

劉樹滔,潘劍茹,傅蓉,陳菁,陳躬瑞,饒平凡,LIU Shu-Tao,PAN Jian-Ru,FU Rong,CHEN Jing,CHEN Gong-Rui,RAO Ping-Fan(福州大學(xué)生物工程研究所,福州,350002) 

刊 名: 中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名: CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY  年,卷(期): 2006 22(9)  分類號(hào): Q78  關(guān)鍵詞: TAT-PTD   跨膜遞送   GST-TAT-GFP  

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