泌尿生殖道支原體和衣原體檢測(cè)的現(xiàn)狀和存在問(wèn)題

[關(guān)鍵詞] 支原體 衣原體 檢測(cè)

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[摘 要］對(duì)泌尿生殖道支原體和衣原體檢測(cè)的現(xiàn)狀進(jìn)行綜述，著重分析目前支原體和衣原體檢測(cè)中存在的亟待解決的問(wèn)題。? 解脲脲原體（UU）、人型支原體（MH）、生殖支原體（MG）和沙眼衣原體（CT）都是寄生在泌尿生殖道的病原體，常引起泌尿生殖道疾患。支原體和衣原體感染不但是非淋菌性尿道炎（NGU）的最主要病因(90%以上)，且已成為發(fā)病率最高的性傳播疾病，已越來(lái)越受到重視。但由于技術(shù)局限，目前對(duì)其檢測(cè)仍存在不少問(wèn)題亟待解決。筆者結(jié)合自己的工作經(jīng)驗(yàn)，綜述并分析泌尿生殖道支原體和衣原體檢測(cè)的現(xiàn)狀和存在問(wèn)題，以裨于試劑的改進(jìn)和臨床檢測(cè)方法的提高。?1 檢測(cè)現(xiàn)狀 1.1 培養(yǎng)法 支原體可用人工合成培養(yǎng)基培養(yǎng)，由于不具有甾醇合成能力，培養(yǎng)系統(tǒng)應(yīng)添加含甾醇等長(zhǎng)鏈不飽和脂肪醇豐富的物質(zhì)，一般采用SP?4培養(yǎng)基加馬血清。MG生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)成分復(fù)雜，生長(zhǎng)極緩慢，一般需2周～3月。CT必須采用細(xì)胞培養(yǎng)，一般用McCoy細(xì)胞系進(jìn)行培養(yǎng)，但細(xì)胞培養(yǎng)需專(zhuān)業(yè)化技術(shù)、試劑和設(shè)備，要求較高，周期也較長(zhǎng)，目前臨床一般不采用，僅在科研單位進(jìn)行科研活動(dòng)，或作為新診斷試劑方法學(xué)評(píng)價(jià)的金標(biāo)準(zhǔn)。培養(yǎng)法不能快速檢測(cè)支原體感染，一般UU和MH需2～3天才能出結(jié)果。不過(guò)隨著實(shí)驗(yàn)水平提高，市面上已出現(xiàn)一些24 h可出結(jié)果的試劑。但MG尚未實(shí)現(xiàn)24 h培養(yǎng)出結(jié)果，因此臨床上不采用培養(yǎng)法檢測(cè)MG，僅用于科研活動(dòng)。 目前臨床培養(yǎng)法檢測(cè)UU和MH多采用液體培養(yǎng)基，加樣培養(yǎng)變色判斷結(jié)果。理論上這種變色也可能由于其它微生物代謝而發(fā)生，因此要求變色后過(guò)濾除菌，再接種到固體培養(yǎng)基上觀察菌落。若培養(yǎng)基選用適當(dāng)抗生素，有效地抑制雜菌生長(zhǎng)，單純液體培養(yǎng)基結(jié)果就有相當(dāng)高的臨床可信度。即使有個(gè)別變色是雜菌所致，標(biāo)本病人也有細(xì)菌性炎癥，采用抗生素也不為過(guò)。 1.2 免疫法 采用此法檢測(cè)的試劑目前臨床較常用。一般為間接法（ELISA法或金標(biāo)法）檢測(cè)抗體，比較而言金標(biāo)法檢測(cè)抗體的試劑用得更多；而用于檢測(cè)支原體抗原的試劑目前尚未商品化。此類(lèi)試劑一般采用夾心法檢測(cè)CT特異性脂多糖抗原(LPS)，影響較大的有金標(biāo)試劑和免疫熒光試劑。由于免疫反應(yīng)的特異性和酶催化底物反應(yīng)的高效性或熒光信號(hào)的高敏性，故此類(lèi)試劑理論上靈敏度和特異性都較高。 1.3 PCR法 此類(lèi)衣原體試劑有定性和定量（多是PCR酶免試劑）兩類(lèi)，而支原體試劑只有定性一類(lèi)。PCR反應(yīng)有較高的靈敏度，對(duì)實(shí)驗(yàn)條件、試劑以及操作人員的要求都較高，操作不當(dāng)易造成錯(cuò)誤判斷，并且PCR定性試劑一般沒(méi)有藥品批準(zhǔn)文號(hào)，臨床上使用應(yīng)慎重。定量試劑有藥品批準(zhǔn)文號(hào)，但面市不久，尚處于推廣中。科研單位使用PCR試劑一般用于鑒定血清型，而醫(yī)療單位使用PCR定量試劑多用于臨床療效觀察。 1.4 快速生化法 由于支原體生化酶反應(yīng)速度和特異性都存在問(wèn)題，目前尚無(wú)檢測(cè)支原體快速生化法試劑，但衣原體已有此方法學(xué)試劑。國(guó)內(nèi)開(kāi)發(fā)的生殖道CT生化檢測(cè)試劑即為此類(lèi)，它是根據(jù)CT侵染上皮細(xì)胞后產(chǎn)生的獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)，配以生化酶試劑與之反應(yīng)，觀察變色與否判斷結(jié)果。臨床觀察資料表明，以細(xì)胞培養(yǎng)為金標(biāo)準(zhǔn)，此試劑的靈敏度和特異性分別為87%以上和97%以上，加之價(jià)格較低，具有良好的應(yīng)用前景。2 存在問(wèn)題 2.1 由于支原體在人群中廣泛存在，許多正常人也有低滴度抗體水平，單純根據(jù)一次抗體檢測(cè)結(jié)果，很難判斷標(biāo)本病人是既往感染還是現(xiàn)癥感染，再次測(cè)定支原體抗體[1] [2] [3]

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